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Hierzu gehören 3D-SIM-Mikroskope und die Lichtscheibenmikroskopie (SPIM bzw. selective plane illumination microscopy). Laser-Scanning-Mikroskop – Chemie-Schule. Siehe auch [ Bearbeiten | Quelltext bearbeiten] Heidelberg Retina Tomograph Literatur [ Bearbeiten | Quelltext bearbeiten] James B. Pawley (Hrsg. ): Handbook of biological confocal microscopy. 3rd Edition. Springer Science and Business Media – LLC, New York NY 2006, ISBN 0-387-25921-X.
e 2 der Fernfeldstrahlung) ist: (3) η = λ π w 0 damit: (4) z R. = λ π η 2 Ab (1) nimmt die Intensität des Strahls bei auf die Hälfte seines Brennpunktmittelwerts ab z = ± z R. Daher ist es natürlich, ein Vielfaches der Rayleigh-Länge als axiale Auflösung zu nennen. Die laterale Auflösung ist jedoch proportional zur Quadratwurzel der Rayleigh-Länge. Für ein voll konfokales System, die Halbwertsbreite axiale Auflösung wird oft zitiert, und dies ist der Abstand zwischen den Punkten, an denen die Intensität in (1) fällt, um 1 /. Laser scanning mikroskop auflösung definition. 2 von seinem Spitzenwert, weil die Empfindlichkeit proportional zum Produkt der Fluoreszenz- und Anregungsstrahlformen ist, dh ungefähr zur Quadratintensität des Anregungsstrahls, so dass die axiale Auflösung ist: (5) Δ z F. W. H. M. ≈ 2 ( 2 - - 1) λ π η 2 ≈ 0, 263 λ η 2 Das Produkt aus Fluoreszenz- und Anregungsintensität in der Brennebene ist proportional zu exp ( - - 4 π 2 η 2 r 2 λ 2) so dass die 1 /. e 2 Durchmesser des Produkts ist: (6) ρ = 2 2 λ π η ≈ 0, 9 λ η Fragen von OP Danke für Ihre Antwort!
Das Fluoreszenz-anregende Laserlicht bewegt sich kontinuierlich über das Präparat, die räumliche Auflösung entsteht dadurch, dass das Fluoreszenzsignal eines bestimmten Zeitabschnitts einem Bildpunkt zugeordnet wird. Es kann sowohl die Fluoreszenzintensität, als auch die Fluoreszenzlebensdauer zur Bilderzeugung benutzt werden, wobei bei letzter zusätzliche Messtechnik erforderlich ist ( siehe auch: Fluoreszenzlebensdauer-Mikroskopie, FLIM). Als Detektoren kommen bei der Abrasterung mit einem Punkt meist Photomultiplier oder Avalanche-Photodioden zum Einsatz, bei den anderen Verfahren CCD-Kameras. Laser-Scanning-Mikroskopie – Keine Kompromisse nötig. Im Mikroskop selbst entsteht zu keinem Zeitpunkt ein vollständiges Bild. Dieses wird bei Punktdetektoren erst durch die Steuerungssoftware zusammengesetzt, bei CCD-Kameras auf dem CCD-Chip. Varianten [ Bearbeiten | Quelltext bearbeiten] Verschiedene Typen von Laser-Scanning-Mikroskopen werden unterschieden: Die historisch ersten Laser-Scanning-Mikroskope waren Flying-Spot-Mikroskope, die ab den 1980er Jahren von konfokalen Laser-Scanning-Mikroskopen abgelöst wurden.
Technisches Grundprinzip Bei einem Konfokalmikroskop wird mithilfe einer Lochblende eine Punktlichtquelle erzeugt. Das vom Objekt zurückkehrende Licht durchtritt eine zweite Lochblende bzw. dieselbe Blende ein zweites Mal und trifft auf den Detektor, in der Regel eine Videokamera. Es entsteht eine Abbildung des beleuchteten Objektbereichs mit einer sehr geringen Tiefenschärfe, d. h. Laser scanning mikroskop auflösung rückstellung. die Lichtintensität nimmt oberhalb und unterhalb der Fokusebene stark ab, sodass nur diese Ebene abgebildet wird. Um nicht nur einen Punkt, sondern die gesamte Fläche des Objekts zu erfassen, wird eine rotierende Blendenscheibe mit spiralförmig angeordneten Löchern (Nipkow-Scheibe) verwendet. Moderne Instrumente nutzen anstelle von bzw. in Kombination mit Lochblenden eine Mikrolinsenscheibe. Auf diese Weise wird die Lichtausbeute erhöht, sodass auch wenig reflektierende oder sogar transparente Objekte abgebildet werden können. Für die dreidimensionale Abtastung wird der Abstand der Optik vom Objekt in winzigen Inkrementen verändert, sodass aus den Schichten der jeweils scharf abgebildeten Ebenen ein räumliches Bild zusammengesetzt wird.
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